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Development of a polymerase chain reaction and its comparison with agar gel immunodiffusion test in the detection of bovine leukemia virus infection Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci.
Camargos,Marcelo Fernandes; Stancek,Daniel; Lessa,Leandro Moreira; Reis,Jenner Karlisson Pimenta; Rocha,Maurílio Andrade; Leite,Rômulo Cerqueira.
Polymerase chain reaction (PCR) was used for bovine leukemia virus (BLV) detection in the peripheral leukocytes of the infected bovines. The primers used were designed to amplify a part of env gene of BLV. PCR products were analyzed by agarose gel electrophoresis stained by ethidium bromide. The analytical specificity of PCR was confirmed by enzymatic restriction analysis of the PCR product with Bam HI and also by nucleotide sequence analysis of three PCR samples. Sixty five animals were tested for anti-BLV antibody, by agar gel-immunodiffusion test (AGID) and for direct BLV detection by PCR. There was a 73.80% concordance rate between the two tests. Four animals positive in AGID were PCR negative, while 13 AGID negative animals were found PCR positive....
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Immunodiffusion; Bovine leukemia virus; Gene; Polymerase chain reaction.
Ano: 2003 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1413-95962003000500005
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Different methods of real-time PCR for detection of pseudorabies virus Ciência Rural
Nonaka,Carolina Kymie Vasques; Fonseca Junior,Antônio Augusto; Guedes,Estefânia Oliveira; D´Ambros,Régia Maria; Lima,Graciela Kunrath; Camargos,Marcelo Fernandes; Heinemann,Marcos Bryan.
ABSTRACT: Pseudorabies (PR) is a highly contagious viral disease of great animal health and economic importance in swine industry. The aim of this study was to evaluate different genomic regions, real-time PCR chemistries and equipment for the molecular diagnosis of PR. Eight primer pairs targeting four genes (gB, gC, gE, gD), three different qPCR chemistries (SybrGreen, hydrolysis probes and plexor) and two equipment (ABI7500, Rotorgene 3000) were evaluated. Oligonucleotides targeting gB using hydrolysis probes showed the best performance after evaluating efficiency (99%), the detection limit (10-1.5 TCID50 mL-1) and diagnostic sensitivity and; therefore, those primers were selected for performance verification factors such as repeatability,...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: Real time PCR; Pseudorabies; Diagnose.
Ano: 2017 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782017000300452
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PCR em tempo real para diagnóstico da leucose enzoótica bovina Ciência Rural
Dias,Natanael Lamas; Fonseca Júnior,Antônio Augusto; Rodrigues,Daniel Sobreira; Camargos,Marcelo Fernandes.
O objetivo deste trabalho foi realizar a validação de uma reação em cadeia da polimerase em tempo real com o sistema Plexor® (qPCR) para o diagnóstico da Leucose Enzoótica Bovina (LEB), por meio da comparação com testes de diagnóstico recomendados pela Organização Mundial de Saúde Animal (OIE). A qPCR foi comparada com duas outras técnicas: a PCR nested (nPCR) e a imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Das 82 amostras analisadas pela qPCR e nPCR, 79 apresentaram resultados concordantes, sendo a concordância, classificada pelo Índice Kappa, como alta. Entre as PCRs e a IDGA, o número de resultados concordantes foi de 71 e 69, respectivamente, para qPCR e nPCR, sendo a concordância classificada como considerável. A qPCR apresentou altos valores de sensibilidade...
Tipo: Info:eu-repo/semantics/article Palavras-chave: BLV; Validação; QPCR; NPCR; IDGA.
Ano: 2012 URL: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0103-84782012000800017
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